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Auramina-rodamina colorazione Raccolta dei campioni Organismi essere colorati con un metodo veloce acido sono di solito presi da un supporto solido o liquido (in) cui sono state coltivate dalla loro fonte originale (per esempio ferite, gola, tamponi, espettorato, etc.). Una sospensione acquosa è fatto, nel caso del mezzo solido, prelevando una piccola quantità di materiale e sospende in una goccia di acqua distillata su un vetrino da microscopio. Si deve prestare attenzione a non fare lo striscio troppo spessa. Nel caso di un liquido, una goccia viene utilizzato direttamente dal contenitore di coltura. Tuttavia, a causa dei solidi dal mezzo, questo metodo non è sempre soddisfacente. La sospensione realizzati o metodo viene essiccato, poi "fisso" passando rapidamente attraverso un becco Bunsen due o tre volte. Lasciare che la macchia si raffreddi prima di colorazione. Procedura Posizionare il striscio "fisso" su un rack di colorazione e scorrevole inondazione con rodamina-auramina per 15 minuti. Non lasciate superficie asciutta. Lavare la macchia con acqua distillata. Bagnare il vetrino con decolorante fluorescente per 2-3 minuti. Sciacquare abbondantemente con acqua distillata. Bagnare il vetrino con permanganato di potassio per 3-4 minuti. Non permettere scorrevole si asciughi. Sciacquare abbondantemente con acqua distillata e asciugare all'aria. Esaminare al microscopio sotto la stessa fonte di luce usati per la microscopia a fluorescenza (cioè un filtro di eccitazione K530 e una barriera BG 12 o filtro di eccitazione G-365 e un filtro di barriera LP 420). Le diapositive possono essere sottoposti a screening ad alta potenza (400X) e verificato in olio da immersione. Nota: Colorazione volte possono variare a seconda dell'individuo. Fonti di errore Surriscaldamento (combustione) durante la fissazione può essere evitato solo toccare il retro del vetrino al dorso della mano ogni volta che il vetrino è stato superato se la fiamma. Non macchiare strisci che sono stati solo l'aria secca. Strisci deve anche essere "fisso". Strisci non dovrebbe essere troppo spessa. Dopo l'essiccazione all'aria, esaminare al microscopio. Se non ci sono aree di separazione batteri, più acqua dovrebbe essere aggiunto per diluire il striscio. Dopo la colorazione è essenziale che la superficie posteriore della slitta è ripulito. Se il lavaggio con acqua distillata non è fatto adeguatamente, la cristallizzazione della macchia può apparire sulla diapositiva.
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